产品货号:
BTN13-21400
中文名称:
猫细小病毒(FPV)PCR试剂盒
英文名称:
Feline Parvovirus PCR Kit
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒基于PCR技术,对PCR产物进行电泳,以定性检测样品中的猫细小病毒。
猫细小病毒(Feline Parvovirus,FPV)是一种DNA病毒,又称为猫传染性肠炎病毒,会引起猫科动物之间的传染病,以高热、呕吐、白细胞严重减少和肠炎为特征,感染病毒后,病猫会迅速脱水,消瘦,眼窝深陷,被毛凌乱,皮肤无弹性,耳鼻,四肢发凉,精神高度沉郁,休克,死亡。从病初症状轻微到严重一般不超过2天,整个病程一般不超过一周,发病迅速,传播范围广,对猫科动物健康造成严重损害,因此猫细小病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。
保存:-20℃,有效期一年。猫细小病毒PCR阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
一、样品DNA的制备
二、设置PCR反应(40μL体系)
三、电泳检测
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猫细小病毒(Feline Parvovirus,FPV)是一种DNA病毒,又称为猫传染性肠炎病毒,会引起猫科动物之间的传染病,以高热、呕吐、白细胞严重减少和肠炎为特征,感染病毒后,病猫会迅速脱水,消瘦,眼窝深陷,被毛凌乱,皮肤无弹性,耳鼻,四肢发凉,精神高度沉郁,休克,死亡。从病初症状轻微到严重一般不超过2天,整个病程一般不超过一周,发病迅速,传播范围广,对猫科动物健康造成严重损害,因此猫细小病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。
- 即开即用,用户只需要提供病毒DNA模板。
- 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猫细小病毒,与其他病毒没有交叉反应。
- 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
- PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
- 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
组分 | 规格 |
PCR MagicMix 3.0 | 1mL |
超纯水 | 1mL |
猫细小病毒PCR引物混合液 | 100μL |
猫细小病毒PCR阳性对照(1×108拷贝/μL) | 50μL |
核酸释放剂 | 9mL |
保存:-20℃,有效期一年。猫细小病毒PCR阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
一、样品DNA的制备
- 用自选方法纯化N+2个样品的RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送15次核酸释放剂试用装,可向我司索要使用说明。
- 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在200μL水中加10μL猫细小病毒PCR阳性对照的10000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用200μL水。提取结束后最后得到200μL模板DNA(每个样品)放冰上待用,溶解DNA沉淀的溶液不能少于200μL,否则PCR抑制物很可能会抑制PCR。
二、设置PCR反应(40μL体系)
- 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成分 N+2个样品管 PCR阴性对照 PCR阳性对照 PCR MagicMix 3.0 各20μL 20μL 20μL 猫细小病毒PCR引物混合液 各2μL 2μL 2μL N+2个样品DNA模板 各18μL - - PCR阴性对照(水) - 18μL - PCR阳性对照(猫细小病毒PCR阳性对照的10000倍稀释液) - - 18μL - 按下表设置PCR反应:
过程 温度 时间 预变性 95℃ 5min PCR反应(35个循环) 95℃ 45sec 54℃ 45sec 72℃ 30sec 最后延伸 72℃ 10min
三、电泳检测
- 取10~20μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为319bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
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